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Pollack, M.
Nichtinvasives Monitoring der HER2-Genamplifikation bei metastasierten Mammakarzinom-Patientinnen.
[ Diplomarbeit/Master Thesis (UNI) ] Universität Graz; 2018. pp.95.
FullText
- Authors Med Uni Graz:
- Advisor:
- Heitzer Ellen
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- Abstract:
- Die Analyse von zellfreier zirkulierender Tumor-DNA (ctDNA) ist eine erfolgversprechende Basis für die individuelle Brustkrebstherapie. Es erlaubt eine nicht-invasive Detektion von prädiktiven Markern, wie beispielsweise Amplifikationen des ERBB2-Gens (HER2) beim Mammakarzinom. Da sich der HER2-Status im Krankheitsverlauf ändern kann, wäre eine nicht-invasive Detektion des HER2-Status vorteilhaft, weil wiederholte Gewebebiopsien zu belastbar sind. Neben immunhistochemischer Methode oder FISH, erlaubt auch die digitale PCR (dPCR) einen hochpräzisen, schnellen und günstigen Nachweis von Genamplifikationen. Das Ziel der Arbeit war daher die Etablierung eines dPCR Assays als diagnostisches, nicht-invasives Verfahren zur HER2-Bestimmung aus Blut, um jederzeit den HER2-Status bei metastasierten Brustkrebs-Patientinnen zu ermitteln. Die Sensitivität und Spezifität des Assays wurde mit HER2-amplifizierten Zelllinien und mit Serum von gesunden Kontrollen bestimmt. Zudem wurden von 47 Patientinnen mit HER2-positiven metastasierendem Brustkrebs Serumproben analysiert. Der Verlauf von der Erstdiagnose bis zur Progression wurde untersucht und Überlebens-Analysen zur Überprüfung der prognostischen Relevanz erstellt. Mit der dPCR konnte eine HER2-Amplifikation in cfDNA im Blut festgestellt werden. Die Sensitivität lag allerdings bei nur 32 %, welches vermutlich auf geringe Tumorfraktionen im Serum zurückzuführen ist. Daher wurden die Ergebnisse der dPCR mit der mFAST-SeqS Methode, die der groben Abschätzung der im Plasma enthaltenen Tumorfraktion dient, verglichen. Wie erwartet, zeigten Sera, in denen die HER2-Amplifikation nicht nachgewiesen werden konnte, einen Tumoranteil von unter 5 %. Zusammenfassend ist die dPCR eine schnelle und kostengünstige Methode zur HER2-Bestimmung, jedoch sind Proben mit geringem Tumoranteil eingeschränkt nutzbar. Dennoch ist die dPCR eine sehr präzise Methode, um den HER2-Status von Brustkrebs mittels Liquid-Biopsie zu ermitteln.