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Gewählte Publikation:
Dietl, S.
In vitro Expression von ADAM-, ADAMTS- und ADAMTSL-Vertretern in trophoblastären Carcinomlinien
[ Diplomarbeit ] Medical University of Graz; 2011. pp. 131
[OPEN ACCESS]
FullText
- Autor*innen der Med Uni Graz:
- Betreuer*innen:
- Ghaffari Tabrizi-Wizsy Nassim
- Sadjak Anton
- Altmetrics:
- Abstract:
- Einleitung: Maligne Tumoren gehören in den westlichen Industrienationen zur zweithäufigsten Todesursache im Erwachsenenalter und stehen daher im Mittelpunkt medizinischer Forschungsbemühungen. Interessanterweise gibt es zwischen malignen Tumorzellen und embryonalen Trophoblasten einige Parallelen, weshalb Studien mit Trophoblasten auch aus onkologischer Sicht interessant erscheinen. Zu diesem Zwecke wurden verschiedene Chorioncarcinomlinien als Trophoblastenmodelle etabliert. An diesen lässt sich auch die Rolle zahlreicher ins Tumorgeschehen involvierter Moleküle untersuchen. Erst seit wenigen Jahren sind hier die Vertreter der ADAM- (A Disintegrin And Metalloproteases) und ADAMTS- (A Disintegrin And Metalloproteases with Thrombo-Spondin motifs) Familien in das Blickfeld der Tumorforschung getreten. Durch die Regulation von Wachstumsfaktoren, die Interaktion mit Integrinen sowie die Degradierung extrazellulärer Matrix nehmen sie auf die Tumorentstehung und -progression Einfluss. Material und Methoden: Zu Beginn dieser Arbeit wurden die vier Chorioncarcinomlinien Jar, Jeg3, Bewo und Ach3p angezüchtet. Nach dem Isolieren ihrer RNA, war die Hauptaufgabe, mittels RT-PCR und Gelelektrophorese nach dem Vorkommen von ADAM-, ADAMTS- und ADAMTSL-Vertretern in den vier Zelllinien zu screenen. Im Anschluss wurde das quantitative Vorkommen von ADAM 28 und ADAMTS 5 mittels Realtime PCR untersucht. Abschließend wurden Fluoreszenzfärbungen mit der Linie Ach3p und einem Antikörper gegen ADAMTS 5 durchgeführt. Ergebnisse: Mittels RT-PCR konnten wir die Expression von ADAM 8, 9, 10, 12, 15, 17, 19, 20, 21, 22, 23, 28, 32 sowie von ADAMTS 1, 3, 5, 6, 7, 9, 13, 17, 20 und ADAMTSL 3, 4 und 5 in den vier Chorioncarcinomlinien nachweisen. In der anschließend für ADAM 28 und ADAMTS 5 durchgeführten Realtime PCR bestätigte sich das Expressionsmuster der RT-PCR. In unseren Immunfluoreszenzfärbungen mit der Linie Ach3p konnten wir schließlich auch den Nachweis von ADAMTS 5 auf Proteinebene führen. Diskussion: Durch unsere Untersuchungen konnten wir ein Expressionsprofil der derzeit bekannten ADAMs, ADAMTSs und ADAMTSLs in den Chorioncarcinomlinien Jar, Jeg3, Bewo und Ach3p auf mRNA Ebene erstellen. Unsere Ergebnisse bilden die Grundlage für weitere funktionelle Versuche und tragen somit zum Verständnis dieser noch relativ neuen Proteinfamilien bei.